2.3.3 荧光染料及其荧光标记引物的制备方法
法医DNA荧光检测试剂盒,由于其对多重PCR扩增灵敏性、均一性、保真性的严苛要求,引物的荧光标记以及规模化高纯度的荧光标记引物的分离成为制约该试剂盒高质量、规模化生产的最重要的因素之一。
由于全自动DNA合成仪的广泛推广,引物的合成目前基本上采用固相亚磷酰胺三酯法,尽管采用的DNA合成仪的生产厂家不同,但不同的设备均基于同样的合成原理。即将起始引物固定在固相载体上完成DNA全链的合成。合成的方向由合成引物的3'端向5'端进行,相邻的核苷酸通过3',5'-磷酸二酯键连接。该方法具有偶联效率高、反应速度快,起始反应物比较稳定等特点。因此,DNA短片段或引物合成已成为一 ...... (共1858字) [阅读本文]>>