2.4.2 复合扩增体系的建立与优化
开发一套高效的多重复合PCR反应体系,需要仔细的设计和大量的测试,努力平衡各引物间及反应组分间的配比关系,一系列热循环参数,如退火温度和延伸时间,往往需要多次实验优化,才能最终确定。
开发一套具备每个PCR产物都具有相近产率的、均衡性好的多重复合PCR反应体系是一项很具有挑战性的工作。对于广泛使用的商业化试剂盒,单个实验室一般不会对PCR再进行优化实验,而是围绕试剂盒推荐说明中提供的最佳条件内部进行有效性验证,对不同条件下多重扩增的性能表现进行研究,例如,以STR峰高的形式研究商品化试剂盒在最佳退火温度、高于和低于其2℃和4℃条件下的PCR产率。如果与推 ...... (共826字) [阅读本文]>>