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2.2.1 DNA聚合酶

分类：警犬良种保纯与繁育3342字

2.2.1.1 DNA聚合酶的发现

1957年，Arthur Kornberg等从大肠杆菌中分离出了一种以DNA为模板催化单核苷酸聚合的酶，称之为Kornberg酶。它是由单一多肽组成的球蛋白，相对分子量为103 kD。Kornberg酶后被证实为DNA聚合酶Ⅰ。DNA聚合酶Ⅰ可被枯草杆菌蛋白酶或胰蛋白酶裂解成两个活性片段，较大的C端片段称为Klenow片段，它仍具有5'-3'聚合酶和3'-5'核酸外切酶活性，但失去了5'-3'核酸外切酶活性。

Klenow片段就是最早应用于PCR的DNA聚合酶。但由于Klenow DNA聚合酶在60℃高温下很快就失去活性，故每一轮PCR都要追加Klenow DNA聚合酶，而且，Klenow酶反应温度偏低，容易形成引物与DNA模板的非特异性扩增，而且反应易受到某些DNA ......     （共3342字）    [阅读本文]>>

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