2.2.3.1 所需化学试剂及配制
热启动耐高温DNA聚合酶制备时所需的化学试剂及其配制方法如表2-2。
表2-2 热启动耐高温DNA聚合酶制备所需化学试剂及配制方法
续表2-2
2.2.3.2 耐高温Taq DNA聚合酶的制备
1.酶蛋白表达
(1)取出菌种，将少许的冰冻菌种培养物在LB平板(含100 mg/ml氨苄西林)上画线，37℃过夜培养16～20 h。
(2)挑取单菌落接种到6 ml含100 mg/ml 氨苄西林的LB培养基中，37℃振荡培养过夜。
(3)将1.25 ml过夜培养的菌种接种到250 ml的LB液体(含100 mg/ml 氨苄西林)摇瓶中，37℃培养4.5 h;在总量1000 ml的培养液中加入0.625 ml的IPTG 溶液诱导(终浓度为0.5mmol/L)。培养液在37℃继续过夜培养16～20 h。
2.酶蛋白提取
(1)将培养液在5000 r/min ...... （共1713字） [阅读本文]>>
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