2.5 GAG的鉴别[13,21]
采用能特异性降解GAG的酶 (表2-3),可鉴别GAG。GAG可在特异性酶的作用下,生成降解产物,可通过色谱检测,确定GAG的种类。
表2-3 GAG特异性解聚酶[13]
酶HACSDSKSHS睾丸透明质酸酶
(testicular hyaluronidase)++---链霉菌透明质酸酶
(Streptomyces hyaluronidase)+----水蛭透明质酸酶
(leech hyaluronidase)+----软骨素酶AC Ⅱ
(chondroitinase AC Ⅱ)++---软骨素酶ABC
(chondroitinase ABC)+++--角质素酶
(keratanase)---+-乙酰肝素酶
(heparitinase)----+肝素酶
(heparinase)----+
注: + 敏感; -抗性; 乙酰肝素酶和肝素酶均指源自Flavobacterium的产品。
酶解条件可参考: 37℃,0.05mol/L Tris-HCl缓冲液 (pH 7.4) 中,加入1mmol/L氯化钙和每1mg GAG 0.002IU酶,酶解2~6h。如CS或DS约200μg,37℃, ...... (共651字) [阅读本文]>>