您现在的位置是:首页 > 科普 > 实用食物营养成分分析

(五) 柱后衍生法

1. 原理

HPLC-OPA柱后衍生离子交换高效液相色谱法,样品中的蛋白质经盐酸水解成游离氨基酸,经氨基酸分析专用柱 (钠型离子交换柱),在流动相的梯度洗脱下,因流动相的pH逐渐增高,氨基酸逐渐失去正电荷,与离子交换树脂的结合逐渐减弱,最后便从树脂上被洗脱下来,由于各种氨基酸的结构不一样,酸碱度不一样,极性、相对分子质量不一样,电荷变化也不一样,因此对树脂的亲和力就不一样,从而达到分离的目的,分离后的氨基酸再由次氯酸把二级胺氧化成一级胺,用OPA进行衍生,荧光检测定量。

2. 适用范围

本方法最低检出限为10pmol。

3. 试剂

试剂为 (A.R.) 级,水为三蒸水经Milli-Q超纯处理。

(1) ......     (共2271字)    [阅读本文]>>

推荐内容

  • 实用食物营养成分分析

    (二) 分析方法的质量鉴定

    在实验室内建立一个新的分析方法,需要知道它的质量如何,才能评价它的测定结果。一般采用下列两种办法来评定一个分析方法的质量。1.精密度(precision)精密度是衡量一个分析方法最常用的指标,它是从量上

    371字 29
  • 实用食物营养成分分析

    (一) 凯氏微量法

    本法系凯氏微量法,有手工滴定定氮和自动定氮仪定氮两种方法。可根据经济条件选择方法。1.原理蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸反应,生成硫酸铵。然后碱化

    2592字 44
  • 实用食物营养成分分析

    (一) 氨基酸自动分析仪法

    1.原理食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸,经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后,与茚三酮溶液产生颜色反应,再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。一份水解液可同时测定天冬氨酸,苏氨酸,丝氨酸,谷氨酸,脯氨酸,

    2498字 29
  • 实用食物营养成分分析

    (二) 胱氨酸的测定——氨基酸自动分析仪法(过甲酸氧化)

    1.原理在用盐酸水解蛋白质的过程中,胱氨酸易被破坏,现多采用过甲酸氧化法将蛋白质中的胱氨酸及半胱氨酸氧化成半胱磺酸,其反应如下:生成的半胱磺酸可在氨基酸自动分析仪上进行测定,与标准半胱磺酸比较,计算其含

    1137字 32
  • 实用食物营养成分分析

    (四) 柱前衍生法

    本方法最低检出限,紫外检测为50pmol;荧光检测为5pmol。1.原理样品中的蛋白质经盐酸水解成游离氨基酸,用OPA/3-MPA-FMOC-CL分别进行一级氨基酸和二级氨基酸衍生,经HPLC反向分离后

    5350字 44